Latest / O Aviário Podcast · by PPGVET / Dra. Dilmara Reischak: Vigilância Sanitária na Avicultura Brasileira | Ep. 77

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Dra. Dilmara Reischak: Vigilância Sanitária na Avicultura Brasileira | Ep. 77 · O Aviário Podcast · by PPGVET

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Bom, a gente já vinha se preparando para a entrada
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da influência no país, sei lá. Eu
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tô aqui no LFDA há 22 anos. Desde
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que eu entrei, isso já era uma constante, né? A
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influência vai chegar, a influência vai chegar, a
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gente só não sabia como. Olá
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pessoal, obrigada por estarem acompanhando mais
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uma vez o Aviário Podcast. Bem
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-vindos, bem -vindas. Eu sou Catarina Estefanel. É
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um prazer estar aqui conversando hoje com a
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doutora Dilmara Aishak. A doutora Dilmara é médica
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veterinária, mestre em ciências veterinárias pela
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URCS. Ela é doutora em epidemiologia,
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experimental, aplicada às onoses pela USP. E
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atualmente é auditora fiscal federal à Grupe Quária do
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Malpa e também responsável técnica substituta pelo
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laboratório de diagnóstico e identificação genética animal
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do Laboratório Federal de Defesa à Grupe Quária, no
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LFDA em São Paulo. Muito prazer, doutora Dilmara.
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Obrigada por aceitar o nosso convite
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pela disponibilidade de participar nessa conversa
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comigo hoje. Obrigada Catarina. Eu
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que agradeço o convite de vocês. É
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um prazer estar aqui no Aviário hoje. E
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estamos aí para responder suas perguntas, sanar
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curiosidades, o que a gente puder ajudar. Tá
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bom? Bom, você trabalha numa área tão
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importante para nossa avicultura. E
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nós já gravamos alguns podcasts, assim, alguns
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episódios em que nós recebemos pessoas,
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especificamente para falar sobre influência aviária,
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dada a grande importância desse tópico. E
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você também é uma das pessoas que trabalha
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especificamente com isso mais ligada à parte
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laboratorial. Podemos começar, talvez, com
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atualizações, como é que está o cenário em relação
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às amostras, para mostrar justamente a importância
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dessas análises que são feitas, dessas monitorias. O
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público que nos acompanha aqui é bem diverso. E
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ele gosta sempre de se manter atualizado. Então,
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nada melhor que a gente se atualizar agora. Bom,
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Catarina Influenza entrou efetivamente no país em
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maio do ano passado. Primeiro
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foco foi detectado ali pelo dia entre 12 e 15 de
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maio. E desde então o número de
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ocorrências, ou seja, de investigações feitas pelo
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mapa, aumentou muito. E só para o pessoal que
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assiste o podcast entender, todas essas investigações,
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ou seja, suspeitas de influência aviária, que são
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atendidas pelo serviço oficial, veterinário oficial,
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elas vêm para o LFDA São Paulo, que é o Laboratório
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de Referência Nacional para o Diagnóstico da Influenza
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no Brasil. Só para vocês terem uma ideia,
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antes da influência efetivamente ser detectada
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no território nacional, nós recebíamos amostras de, no
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máximo, sem investigações por ano, estourando sem
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investigações por ano. Em 2023, vou trazer um outro
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dado para vocês, foram quase 700 ocorrências
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atendidas. Então, assim, a gente está
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trabalhando no laboratório com uma quantidade de
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amostras sete vezes superior a que a gente costumava
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receber na rotina até a chegada da influência. Isso
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daí por ano, é quase 10 mil amostras analisadas,
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porque cada ocorrência dessas gera um determinado
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número de amostras. E a partir daí de todos os
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ensaios que a gente faz, vocês conseguem acompanhar
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no painel do mapa que está disponível online, quantos
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focos já foram detectados. A
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gente está hoje com 160 focos de influência viária
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de alta patogemicidade causada pelo subtipo H5N1
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do vírus e temos quase que diariamente novas
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investigações em andamento. Mas
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não é só isso que o mapa e o LFDA estão fazendo
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para a influência viária. Isso
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que eu falei para vocês é muito específico, é o que
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a gente chama da vigilância passiva, ou seja, o
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atendimento a um caso suspeito, mas a gente
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também faz uma vigilância ativa. O
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serviço veterinar oficial vai atrás. Isso
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é feito de forma coordenada com um delineamento
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experimental. Essa vigilância ativa tem ciclos
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anuais, a gente está agora no ciclo 2023, 2024. E
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só a de vigilância ativa, que é feito tanto na
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agricultura comercial, como na agricultura de
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subsistência, a gente já está na casa de quase 7
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mil amostras analisadas, sendo que em 2023, somando
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tudo que foi processado no LFDA São Paulo e no LFDA
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Rio Grande do Sul, que nos ajuda com parte dessas
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análises, a gente teve mais de 40 mil amostras
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analisadas. Então vejam que é um volume
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grande de amostras processada por ano. E
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que impacta na rotina do laboratório e até no
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comércio. Na hora que a gente libera
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esses resultados, os nossos parceiros comerciais estão
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lá de olho no painel do mapa para saber onde estão
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as ocorrências, em que estado que tem em caso
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suspeito, se já saiu o resultado, porque os
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encortadores de carne de frango se importam com
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isso. Eles querem saber. Então
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aquele painel é muito importante para a
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transparência dos nossos dados. Imagine
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ter à disposição uma solução que combine rapidez
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e interpretação personalizada para gerenciar os riscos
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das micotoxinas em sua empresa? Pega
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as o science e a resposta. Realizamos
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a quantificação em tempo real das principais
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micotoxinas, promovendo decisões mais assertivas,
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resultando em um gerenciamento macroeconômico
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e sustentável. Eu quero aproveitar para
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parabenizar o trabalho de vocês. Esse
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trabalho intenso que vocês sempre fizeram, mas que
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especialmente agora vocês têm se dedicado ainda mais.
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Eu vi que você está com a
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camiseta do LFDA. Eu acho que para conceituar
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também eu queria pedir para você contar um pouco qual
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que é o papel, o trabalho do LFDA São Paulo, como
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referência também na Organização Mundial da
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Saúde, o que vocês têm trabalhado. O
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LFDA São Paulo é um dos LFDAs. No
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total a rede LFDA consiste de seis laboratórios e o
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nosso aqui em Campinas, a área de diagnóstico animal
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é dedicada ao diagnóstico de doenças das aves. Mas
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qualquer doença de aves? Não,
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apenas aquelas que estão contempladas no Programa
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Nacional de Sinidade Avícola do mapa. Então
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o nosso laboratório faz diagnóstico oficial da
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influenza viária, da doença de Newcastle, das
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salmonellosis aviárias e das micoplasmosis aviárias. O
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nosso laboratório surgiu na década de 80, não com esse
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nome, não era sequer LFDA, o nome do próprio
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laboratório foi mudando ao longo do tempo, mas a área
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específica voltada para a sanidade avícola surgiu na
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década de 80 e por uma necessidade muito básica de
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fazer o controle do material genético avícola
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que era importado pelo Brasil. Nós
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sempre fomos dependentes dessa importação de material
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genético avícola e por causa dos casos de
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influenza em Newcastle, na América do Norte, que já
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tinha naquela ocasião, surgiu essa necessidade do
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mapa controlar o que a gente estava importando para
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assegurar que não estava entrando essas doenças no
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país. Então esse foi o propósito e por
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que foi em Campinas? Porque perto de viracopos e as
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importações sempre chegaram e chegam até hoje de
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material genético avícola por viracopos? Então
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essa proximidade com a aeroporto facilitava a
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logística e a unidade surgiu. Pois
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bem, a unidade começou então na década de 80
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fazendo ali o beabá, o arroz com feijão e conforme
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a vicultura nacional foi crescendo, novas demandas
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foram surgindo para atender esse aumento da produção
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avícola nacional também e foram sendo implementadas
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novas tecnologias, novas metodologias para fazer o
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diagnóstico cada vez mais rápido e mais preciso
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dessas doenças que são de interesse para o Ministério
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da Agricultura. Lá pela década de 90 surgiu a
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necessidade, por exemplo, de nós termos um laboratório
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com nível de biosegurança para poder manipular mostras
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suspeitas de Newcastle. Então
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em 95 a gente inaugurou o primeiro laboratório aqui,
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Mil Seguros, para manipular essas amostras suspeitas e
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a avicultura continuou crescendo e a necessidade
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de continuar crescendo com o laboratório também. E
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aí a gente chega naquela fase em que as metodologias
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de biologia molecular passam a ser as grandes estrelas
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nos laboratórios, principalmente nos
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laboratórios fora do país. E
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claro que veio uma cobrança, principalmente da
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iniciativa privada, para que o LFDA se adequasse a
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isso, porque as metodologias que nós usávamos na época,
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tanto para a detecção de vírus quanto de bactéria,
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eram as metodologias convencionais de laboratório,
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o isolamento em ovo para vírus, o isolamento em meio
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de cultura para bactéria. E aí nós começamos então, o
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mapa começou um investimento para que essas metodologias
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de biologia molecular fossem implementadas aqui no
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laboratório. Isso é claro que levou um
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tempo, no serviço público tudo é mais devagar do que
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na iniciativa privada. A gente precisa de recurso
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público para fazer isso, precisa capacitar o pessoal.
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Então em 2008 nós efetivamente
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entramos na era da biologia molecular, para o
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diagnóstico das enfermidades de controle oficial aqui no
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LFDA São Paulo. A partir daí, só para vocês
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terem uma ideia, um diagnóstico de doença de
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Newcastle, que podia demorar até três semanas, passou a
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ser dado em sete dias. Então
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isso trouxe um ganho para os colegas da defesa
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sanitária animal. Antes eles precisavam ficar
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esperando, imagina três semanas para ter um
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diagnóstico confirmatório de Newcastle, enquanto a granja
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estava lá interditada, não podendo ser liberada. E
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a partir desse momento começou a tudo ir muito
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mais rápido. Hoje em dia, por exemplo, com a
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influenza a gente dá esse resultado em 24 horas.
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Então de 2008 para cá também a
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gente deu um salto, evoluiu bastante. E
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isso é importantíssimo para defesa agropecuária, ter
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essa resposta rápida do laboratório para que as
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ações de campo possam ser tomadas rapidamente também.
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E aí no meio disso tudo,
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Catarina, da gente implementando mais e mais
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metodologias e o laboratório crescendo para atender essa
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demanda da própria agricultura nacional, surgiu
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uma necessidade regional de ter um laboratório de
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referência que não fosse na América do Norte e nem na
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Europa, que é onde estavam localizados os laboratórios
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de referência da ONSA, ou a Organização Mundial de
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Saúde Animal. Em 2006, pela primeira vez, o
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mapa submeteu a Organização Mundial de Saúde Animal, a
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Antiga OIE, a candidatura do nosso laboratório aqui
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em Campinas como laboratório de referência. Essa
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candidatura ocorreu num encontro de laboratórios de
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referência que aconteceu em Santa Catarina, em
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Florianópolis, que foi o primeiro organizado pela
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ONSA específico para laboratórios de referência.
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E lá o mapa então nos
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apresentou para a ONSA, para a OIE na época, e
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disse assim, queremos ser referência. Foi
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um evento, todo mundo aguardando ansiosamente. E
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a OIE na época retornou para a gente o seguinte,
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olha, a gente reconhece a capacidade técnica de vocês,
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a expertise dos profissionais, mas vocês têm
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umas coisinhas para melhorar, antes de serem
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referência. Vocês precisam ter o diagnóstico
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molecular completamente implementado, precisam ter
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uma melhor estrutura de biosegurança, precisam ter
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maior interação internacional, precisam ser
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conhecidos internacionalmente. E
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depois que vocês fizerem essa lição de casa, aí a
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gente rever essa candidatura de vocês. E
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foi lá também que a própria ONSA sugeriu que
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nós fizéssemos uma parceria com um laboratório de
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referência, um laboratório já instituído, né? E
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nós fizemos tudo isso, né? Começamos
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um programa de twinning, ou agemilamento, com um
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laboratório americano que já é referência para ONSA há
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muitos anos, e começamos a implantar a biologia
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molecular, começamos a conceber o projeto do nosso
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novo laboratório, que está aqui hoje de pé,
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funcionando com um NB3 supermoderno, que não deixa
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nada a desejar para nenhum laboratório do mundo. E
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aumentamos a nossa interação internacional. E
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como que foi isso? Como eu falei lá no início, os
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países da região sempre sentiram necessidade de ter
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um laboratório de referência, né? Quando
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nos reuníamos em alguns eventos e tal, esse assunto
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sempre vinha à tona. Por que a gente não tem um
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laboratório de referência na região? Quem
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gostaria de ser laboratório de referência na região,
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né? E é um assunto delicado,
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porque ser laboratório de referência traz consigo
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muitas atribuições. E todo mundo que é técnico
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de laboratório sabe da dificuldade que seria manter
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um laboratório de referência, aqui na região,
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em qualquer dos nossos países. Pois
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bem, em 2014 a gente fez uma reunião aqui no LFDA
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de São Paulo, reunimos todos os países, junto com
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uma representante do NBSL, Laboratório de Referência
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Americano. Foi uma iniciativa apoiada
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também pela BPA, na época, o BABEF. E
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nós fundamos, então, a rede sul -americana de diagnóstico
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de influência em Newcastle. Essa
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rede é constituída pelos laboratórios oficiais de
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diagnóstico de influência em Newcastle de nove países da
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região. E o LFDA, a partir do
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momento que ele se foi reconhecido como laboratório
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de referência da Organização de Audeção de Animal, ele
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passou também a ser o coordenador dessa rede.
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Então, veja que hoje nós temos
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muitas atribuições, né? Se nós formos ver aquele
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laboratório lá da década de 80, que começou para
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atender uma demanda muito pontual de importação de
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material genético à vícola, né? Ao
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longo de todos esses anos, nós tivemos que implementar
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várias metodologias. Nós somos laboratório coordenador
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de uma rede sul -americana de laboratórios. Fomos
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reconhecidos como laboratório de referência da OIE em
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2016, então temos aí quase oito anos já desse
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reconhecimento, né? E seguimos atendendo todas as
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demandas do mapa, né? E mais do que isso, não só
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atendendo, como implantando procedimentos e metodologias
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para que esse atendimento seja cada vez mais rápido,
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que a detecção das doenças seja precoce, com
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metodologias sensíveis específicas, né? Então,
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assim, ao longo desses mais de 30 anos, o laboratório
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cresceu muito, né? E são coisas que realmente as
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pessoas às vezes não, de fora, não conseguem
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acompanhar ou desconhecem completamente, né, Catarina?
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Do tanto que o diagnóstico
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evoluiu dentro do mapa. Que história bonita, né? Depois
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eu vou querer entrar nessa parte de diagnóstico, de
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técnicas, mas antes eu queria perguntar assim, na
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verdade, pedir para você contar para nós como é que
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foi a chegada dos primeiros casos, a detecção e também
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as demandas que o laboratório tem tido, né,
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atualmente. Bom, a gente já vem se
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preparando para a entrada da influência no país, sei
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lá, eu estou aqui no LFDA há 22 anos. Desde
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que eu entrei, isso já era uma constante, né? A
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influência vai chegar, a influência vai chegar, a
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gente só não sabia como. Foi
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no dia 19 de outubro de 2022, que ela efetivamente
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entrou na região, na Colômbia, né? E
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foi uma situação curiosa, porque nós, da resúdio, né,
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da rede, estávamos reunidos nesse dia, numa reunião lá
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em Buenos Aires, numa reunião anual. E
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foi o dia que a influência chegou, nenhum de nós vai
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esquecer, é óbvio, né? Porque
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começaram rumores nessa reunião, né? Ah,
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viram, tem influência na Colômbia e tal. E
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ninguém acreditava, porque naquele momento era um
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rumor, será que é verdade ou não, né? Foi
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todo mundo para as redes sociais, para o Google
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procurar se era verdade. Mas
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aí o próprio colega da Colômbia, que estava lá
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conosco, uma hora, ele reuniu todo mundo e falou.
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E aí, a partir desse momento,
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Catarina, nossa vida mudou consideravelmente, assim. A
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gente passou do momento de calmaria para a tormenta,
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né? Rápidamente, assim. E
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por quê? Como eu falei para vocês, nós
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somos laboratórios de referência da Organização
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Mundial de Saúde Animal. É de praxe que laboratórios
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que não são de referência mundial, né? Encamim
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suas amostras positivas por um laboratório de referência
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da OIE para serem confirmados. E
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foi justamente isso que aconteceu com o primeiro
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caso da Colômbia. Os colegas do Laboratório de
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Referência Nacional, lá em Bogotá, diagnosticaram o
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caso, fizeram os ensaios preliminares e enviaram
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essas amostras aqui para a gente, para que a gente
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confirmasse o resultado deles. A
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partir daí, nós já começamos a nos deparar com
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uma situação ao qual não estávamos acostumados, porque
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como a gente não tinha influência na região, foi a
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primeira vez que a gente foi demandado para
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confirmar, né? Fazer uma confirmação
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internacional. Mas isso nos trouxe muito
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aprendizado também. Porque a gente tinha que dar uma
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resposta rápida para eles, né? Porque,
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afinal, mandaram para o Laboratório de Referência e
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vem cá, a gente quer saber, é mesmo um H5, qual
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é o N, é de autobaixa patogênicidade, e a gente
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quer que vocês nos digam. Então,
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a gente precisou correr atrás num curto espaço de
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tempo de melhoria, das nossas metodologias, para
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conseguir dar esse retorno aos demais países. E
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a partir daí também começaram a incrementar as
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amostras de ocorrências aqui no Brasil. Porque,
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claro, nas fronteiras se intensificou a vigilância,
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qualquer ave que aparecesse doente já era uma suspeita
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de influência aviária. A partir daí, então, já
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começou um crescente no nosso recebimento de
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amostras suspeitas, e a gente teve que se organizar
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internamente para atender a isso. Conturnos
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de trabalho, trabalho ao final de semana, né? Como
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encaixar as amostras dos outros países que são
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importantes. Dentro da nossa rotina de
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trabalho, sendo que ocorrências do Brasil
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estavam chegando ao mesmo tempo, né? Como
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fazer isso da melhor maneira possível para que
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todos tenham a sua resposta num curto prazo. Então,
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assim, mas foi excelente. Porque
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a gente começou a se preparar já para o pior
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que viria, que foi quando o primeiro caso foi
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detectado em maio de 2023, no 30 Reis de Bando, lá
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do Espírito Santo, né? Como os casos, vou explicar para
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vocês, como os casos estavam acontecendo no
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Pacífico, para o lado do Pacífico, Bogota, Colômbia,
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depois Equador teve também, Bolívia, Chile, estava
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descendo lá. A gente esperava que a gente
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fosse detectar o primeiro caso lá pelo Rio Grande do
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Sul, que descessem as aves e depois entrasse pelo
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Atlântico por lá, ou que viesse por dentro do
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continente, né? E a gente pegasse na
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fronteira ali com o Brasil. E
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não foi o que aconteceu. Quando
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a gente se deparou com aquele resultado positivo do
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30 Reis do Espírito Santo, em maio, no final de
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semana, ali de 12 a 15, foi um pega para capar,
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porque a gente estava se preparando para detectar o
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primeiro caso. Mas a gente sempre fica
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esperando também que ele não aconteça, né, Catarina?
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Essa é a verdade. Ah,
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enquanto estiver nos outros países, está bom. Mas
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aqui não. E aí sim que a vida virou
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de cabeça para baixo, né? Como
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eu falei para vocês, a gente passou de 100
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notificações por ano para quase 700. E
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isso para um laboratório é um aumento surreal, assim,
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né? Claro que sempre nos falaram ao
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dia que vocês tiverem influência, os outros
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laboratórios, que estavam acostumados. O
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dia que vocês tiverem influência, vocês vão ver,
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né? Que nada é suficiente. E
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realmente é verdade. Os equipamentos que a gente
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tinha já eram poucos. O pessoal que a gente tinha
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já era pouco, né? Os insumos que a gente tinha
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já eram poucos. Então, assim, a gente teve que
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lançar a mão de várias estratégias para utilizar,
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com sabedoria, todos os recursos, né? Financeiros,
23:00
humanos, os nossos equipamentos para atender
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essa demanda, né? Mas tudo é aprendizado, né? E
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até anterior a isso, ao caos da influência, eu
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diria que uma escola muito boa que nós tivemos e que
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eu lembrei agora, foi a pandemia do Covid. Porque
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durante a pandemia, o nosso laboratório auxiliou o
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governo de São Paulo, né? Fez
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parte daquela rede. Então, ali já foi um grande
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aprendizado por que estaria por vir, sabe? Um
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quantitativo enorme de amostras e tendo que dar
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uma resposta rápida. Então, Catarina, hoje a gente está
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nessa fase. Agora, claro, o número de casos
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diminuiu, né? Mas a gente já está se
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preparando para uma próxima temporada, quem sabe, né? A
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gente ainda não... A gente ainda está detectando,
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né? A gente teve uns 45 dias sem
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detecção de influência, agora no final de 2003,
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2023 e início de 2024, mas já começaram a pipocar
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casos em silvestres de novo. Felizmente,
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né? Mantivemos em silvestres apenas, só
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três casos em a vivicultura de subsistência e nem um
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registro em a vivicultura comercial, o que é um
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grande ganho, né? Para todos nós. Exato.
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Aí que eu também queria chegar, né? Mais
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uma vez ressaltar um importante trabalho, né? Em
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bioseguridade, na monitoria, prevenção, né? Feito
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por todas as nossas agroindústrias, cooperativas,
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empresas técnicas, os pessoas envolvidas, o
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Ministério da Agricultura, né? Para
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quem a influência não chegue nos nossos plantéis
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comerciais e para quem nós, se damos livres. É,
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mas é um trabalho árduo e que tem que continuar, né?
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Não acabou a influência estar
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aqui agora, né? Historicamente,
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a gente consegue perceber que uma vez que ela entra
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no país, ela permanece, então, assim, vamos
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incrementar as medidas, né, de prevenção, porque são
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necessárias, a gente segurou até agora com esforço,
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conjunto, né? Todos estamos de parabéns, eu
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acho, por isso. É reconhecido, né, por os
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nossos parceiros comerciais, mas também estão todos de
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olho na gente. Então, assim, é importantíssimo,
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né? Mantenha esse alerta, né? Mantenha
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todos o alerta. O desafio é grande, né? Sim.
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Falando um pouquinho, assim, sobre a colheita de
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amostras, né? Eu queria aproveitar a sua
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presença para perguntar qual que é a importância da
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colheita de amostras, armazenamento, o que deve
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ser feito, as situações que você se depara, né, como
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laboratório também. Sim. Olha, Catarina, esse é um
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assunto que é para fazer... Para
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quem trabalha com diagnóstico laboratorial, a
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amostra é tudo, né? A gente não faz diagnóstico
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sem uma amostra. Então, a coleta da amostra, o
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armazenamento, o envio para o laboratório são etapas
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importantíssimas do processo e muitas vezes
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negligenciada, né? Porque algumas pessoas eu acho que
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talvez encarem assim, ah, eu vou coletar aqui o que
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eu consegui coletar, o que der para fazer tá bom o
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laboratório e vai conseguir fazer alguma coisa. E
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isso não é verdade, né? Para
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o laboratório dar um resultado confiável para o
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serviço veterinário oficial, ele precisa de uma amostra
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de boa qualidade. Não existe diagnóstico confiável
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e seguro sem uma amostra de boa qualidade. Então,
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assim, a gente vem trabalhando há muitos anos
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com esta questão da coleta de amostras, né, pelo
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serviço veterinário oficial, porque é importante falar
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isso agora, né? Os laboratórios federais de
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defesa agropecuária, eles só recebem amostras encaminhadas
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pelo serviço veterinário oficial. O
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dono da grande proprietário lá, de uma subsistência,
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ele não pode encaminhar amostras diretamente para
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nós, né? Ele tem que notificar o serviço
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veterinário oficial e aí sim, essa amostra vai ser
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lá coletada e encaminhada. Então,
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o trabalho que a gente faz é focado no serviço
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veterinário oficial. E tem várias medidas que a
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gente sempre preconiza, né? Utilizar
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o material adequado para a coleta de amostras, né? Por
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exemplo, para a influência em Newcastle, os suaves de
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cloaca e traqueia são um excelente material de
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eleição. Ah, então eu vou ali e coleto
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com qualquer suave. Posso comprar o suave mais
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baratinho de algodão com ácido de madeira. Eu
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mando isso para o laboratório sem meio e o
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laboratório vai chegar lá, vai fazer mágica ou milagre
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e vai me dar um retorno. Não,
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não vai, né? A gente precisa que seja
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colhido com um suave adequado, um suave
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sintético, com ácido de plástico. Por
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quê? Porque o suave de algodão com
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ácido de madeira possui substâncias ali que são
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inerentes ao processo de fabricação do suave, que
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acabam inativando os agentes que a gente está
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pesquisando, né? Então prejudicam as técnicas que
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a gente vai realizar no laboratório. Então
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sempre focar nisso, né? Usar
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o melhor material para colheita, colocar os suaves
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em meio de transporte, não colocar a meia dúzia de
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suave em um litro de meio, porque isso não serve, né?
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Ter a proporção adequada no
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momento que estiver fazendo uma necrópsia, fazer a
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necrópsia a campo da forma mais asséptica possível, né?
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Coletar o material, pequenos
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fragmentos, colocar, acondicionar isso,
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identificar, às vezes as pessoas acham que não
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precisa identificar. E aí chega no laboratório uma
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mostra que a gente não consegue identificar do que
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é, mas o que é isso? Um pulmão é um fígado, né? A
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gente precisa saber exatamente do que se trata.
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E aí, Catarina, ao longo dos
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anos a gente vem investindo muito nisso, inclusive com
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o manual de coleta. Existe um manual de coleta para o
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PNSA no site do mapa, lá dentro da parte específica
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do Programa Nacional de Sanidade à Vícola. E
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ali tem todas as recomendações que o material
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usar, como coletar, né? Existem
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vídeos, né? Até como se para mentar para
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atender, para atender um caso suspeito de influenza,
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por exemplo, né? Tudo isso faz parte do processo,
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tudo é importante, né? A gente está trabalhando com
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uma doença zoonótica, então não se pode minimizar, não
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é nem minimizar, não se pode negligenciar os riscos,
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né? Os riscos estão aí e de novo,
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tomar os cuidados, coletar melhor a mostra possível e
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encaminhar para o laboratório adequadamente.
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Cadeia de frio, importantíssimo,
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né? Não adianta a mostra chegar
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quente no laboratório que ela é descartada, né? A
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gente descarta, a gente sabe do trabalho que dá
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para coletar o quanto que os colegas às vezes
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enfrentam de dificuldade para ir até uma propriedade
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fazer uma coleta, abaixo de sol, ou de chuva, expostos
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a todo tipo de interpere, mas o laboratório não pode
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garantir que está dando um bom resultado se não tiver
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uma mostra adequada, né? E aí nisso tu perguntaste
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sobre, ah, com que tipo de coisa que a gente se
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depara, né? Infinitas, assim, é até engraçado.
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Dava para escrever um livro das
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coisas engraçadas que a gente já recebeu no
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laboratório, né? Desde amostras armazenadas dentro
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de um pote de açaí congelado para manter a
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temperatura, não é? O propósito foi comprido, né?
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Porque se botou a amostra com um
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pote de açaí, perfeito, ela chegou geladinha, mas gente,
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não dá para mandar amostra com um pote de açaí para
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o laboratório, né? E na adequações, as
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inadequações mais comuns que a gente recebe são
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temperatura inadequada, né? O
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Brasil tem realmente um tamanho enorme, então uma
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amostra que vem do norte, do nordeste, ela tem que
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vir com uma carga adicional de gelo para que isso se
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mantenha, né? E às vezes isso não acontece.
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Soro, né? Com
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lipemia, com hemoles, tudo isso a gente descarta no
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laboratório. Bom, Doutora Gilmar, nos
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encaminhando mais para o final, para aquele pessoal
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que gosta de laboratório, você já falou um pouco das
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técnicas, né? Então, eu queria aproveitar para
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perguntar um pouco essas técnicas de diagnóstico
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laboratorial, especialmente para a Influencer. Sim.
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Assim, eu vou tentar explicar para vocês
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rapidamente como que é o algoritmo que a gente usa
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no laboratório, porque aí a gente vai abordando todas
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as técnicas. Uma vez que o LFDA recebe uma
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amostra, vou falar de uma amostra suspeita para
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Influenza ou para Newcastle, tá bem? Já
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que o tema do podcast é Influenza Viária. O
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laboratório recebeu amostras suspeitas de Influenza
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Viária. O que a gente vai fazer?
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Normalmente, essas amostras consistem de
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fragmentos de tecidos, né? E
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que tecidos são esses? Tecidos
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do sistema nervoso, do sistema digestório e do
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sistema respiratório das aves. Suaves
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de cloaca e suaves de traqueia. Isso
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é o que a gente recebe. Chegando
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no laboratório, a gente vai precisar fazer um preparo
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dessas amostras para que, então, elas sejam submetidas
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aos ensaios, as provas de laboratório propriamente
32:32
ditas, né? Os tecidos, por exemplo, eles
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precisam ser macerados, tratados com antibiótimo,
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né? E a partir daí desse
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tratamento que a gente faz, a gente consegue tanto
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inocular essas amostras em ovo embrionado de galinhas
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SPF, né? Se a gente quiser isolar o
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vírus que está ali, se a gente precisar isolar o
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vírus que está naquela amostra, quanto a gente
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consegue encaminhar essa amostra para a biologia
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molecular? Ah, a biologia molecular. E
33:00
o que faz na biologia molecular? A
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gente amplifica o RNA, né? Específico
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do vírus da Influenza Viária ou da doença de
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Newcastle. Então, a gente pega aquela amostra
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lá de campo que já foi pré -processada, a gente
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extrai o RNA, que está lá presente na amostra, ou
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não, né? Aplica primers e sondas
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específicos, não vou entrar em mérito aqui dos óligo
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nucleotíduos, mas, enfim, a gente faz múltiplas cópias
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daquele ácido nucleico viral e consegue ver isso na
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tela do computador, a quantidade de cópias
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aumentando. E com isso a gente vê que,
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ok, temos o vírus da Influenza ali, ou temos o
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vírus de Newcastle, né? E ele está em pequena
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quantidade, ou em grande quantidade, por assim dizer.
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Ok, temos Influenza. E
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agora, que Influenza é? Porque
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a gente tem, pode ter até 16 sub -tipos de Influenza
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numa amostra coletada de uma ave, principalmente se
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formar ave silvestre. A partir daí, então, a gente
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vai fazer os PCRs, que são específicos para os sub
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-tipos, para H5 e para H7, que são os mais comuns,
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por serem de alta patogênica e cidade, e a
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gente também procura o sub -tipo H9, que pode causar
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problemas em aves e também as onótico. Então,
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a gente, de um PCR ali, positivo para Influenza, a
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gente faz outros três, no mínimo. Deu
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positivo para H5, que é o que tem acontecido, né? É,
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nos casos que a gente encontra, a gente vai fazer
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mais provas, mais PCRs. Uma específica para o N1, para
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saber se é H5, N1 ou vírus. E
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uma específica para o clado, 2, 3, 4, 4, que é
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o clado que está circulando na região. Então,
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ao final, aí, desses testes, o screening, que é
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o Influenza, e esses testes complementares, o laboratório
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já consegue dizer para o serviço veterinário oficial.
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Temos Influenza, é uma Influenza
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H5, N1, clado 2, 3, 4, 4. Como
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esse clado tem vírus de alta patogênicidade, a gente
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já tem aí um indicativo, né? De
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que se trata de um vírus de alta patogênicidade. Mas
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a gente só vai confirmar a alta patogênicidade dele
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sequenciando. Então, a gente pega lá aquele
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fragmento de RNA, né? Transforma
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em DNA e sequencia. Faz um sequenciamento parcial da
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hemaglutinina para olhar lá no site de clivagem e
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dizer, ok, tem uma sequência de aminoácidos
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compatível com vírus de Influenza Viária de alta
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patogênicidade. Então, vejam quantas etapas tem
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até a gente chegar nesse finalzinho, né? Que
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é o que interessa para o serviço veterinário oficial.
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Só que paralelamente a isso, a
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gente também falou da vigilância ativa, né? Na
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vigilância ativa, muitas vezes a gente não precisa
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chegar em todo esse detalhamento dos ensaios,
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né? A tanto os ensaios assim, a
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gente faz o quê? Um ensai de pesquisa de
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anticorpo para dizer, essa ave entrou em contato com
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Influenza, assim ou não? É isso. Se
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ela entrou, a gente faz um teste adicional para tentar
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descobrir para que hemaglutinina que aquela ave
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tenha anticorpo. Também pode ser de H1 até H16.
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Então são 16 testes realizados a
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partir de uma amostra. E a partir dos PCRs, e a
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partir dos SWABs, desculpa, de Troquêia e Cloaca, que
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são coletados na vigilância ativa, a gente faz os
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PCRs. Normalmente, como é uma amostra que não
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é de suspeita, né? Que é só uma investigação, um
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monitoramento, essas amostras são negativas nos PCR de
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triagem, tanto para Influenza quanto para
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Newcastle. Então é mais simples o
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diagnóstico do que de um caso provável, né? Que
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pode chegar até o isolamento. No
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isolamento, às vezes, a gente tem que fazer mais
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de uma passagem em ovos embrionados para conseguir
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isolar o vírus. E a partir desses isolamentos,
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a gente tem outros testes para identificar e
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caracterizar o vírus que está isolado. Então,
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assim, um diagnóstico de Influenza completo. Se
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nós precisarmos lançar mão de todas as metodologias
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necessárias, se alguma delas falhar, a gente precisa
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fazer o rol inteiro, pode demorar até duas semanas,
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às vezes, até mais, se nós tivermos que inocular o
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vírus em aves, por exemplo, para saber se ele é
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patogênico ou não. Porque se o sequenciamento falha,
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a orientação do manual da ONCE, né, que seja feito e
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VPI, que é um teste de inoculação em vivo, né? A
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gente precisa inocular o vírus isolado em aves para
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ver o efeito que ele causa, né? Felizmente,
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nunca precisamos disso, né? Nesse
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tempo que eu estou aqui no laboratório, nunca fizemos
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um VPI, nunca foi preciso, e que assim seja e
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continuemos, né? A gente consiga solucionar
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todos os casos, apenas com as metodologias de biologia
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molecular. Que bom ouvir tudo isso de
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vocês. Acho que é um bom conhecimento
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para ser também divulgado desse trabalho interno de
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vocês. Bom, doutora Jumara, obrigada por
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aceitar o convite, por participar conosco, por
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todas essas explicações, eu gostaria de te agradecer
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mais uma vez pela tua participação. Eu
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aqui agradeço, Catarina, espero que não tenha sido
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uma açante, né? Já que é um tema bastante
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específico, e as pessoas podem ficar entediadas, né?
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Mas espero que tenha servido
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para dar uma ideia do que a gente faz dentro do
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laboratório oficial, né? E mais especificamente, um
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laboratório oficial que faz diagnóstico da influência
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aqui no país. Com certeza serviu bastante. Eu
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quero agradecer também as pessoas que nos acompanharam
39:04
hoje e até uma próxima conversa.